Matur nuwun kanggo Visiting Nature.com. Versi Browser sing digunakake wis diwatesi dhukungan CSS. Kanggo asil sing paling apik, disaranake sampeyan nggunakake versi anyar browser (utawa mateni mode kompatibilitas ing Internet Explorer). Ing sawetoro wektu, kanggo njamin dhukungan, kita nampilake situs tanpa gaya utawa JavaScript.
Wutah mikroba ing luka asring muncul minangka biofilms, sing ngganggu marasake awakmu lan angel nyingkirake. Gaun Perak anyar ngaku kanggo pertempuran infeksi luka, nanging efek khasat antibiofilm lan efek penyembuhan mandhiri umume ora dingerteni. Nggunakake ing vitro lan ing model vivo biofilmi staphylococcus aureus lan pseudomonas aeruginosa, kita nglaporake efektifitas gaun ag1 + kanggo ngasilake gaun; AG1 + Klambi sing ngemot asam etileniaminmalletetetic lan benzethonium klorida (ag1 + / edta / bc), lan klamben sing ngemot nitrat perak (ag. , sing ngasilake AG1 +, AG2 + lan Ion Ag3 + kanggo pertempuran biofilm tatu lan efek kanggo marasake awakmu. Gaun ag1 + duwe efek minimal ing biofilm luka ing vitro lan tikus (C57L / 6J). Beda, uyah ag lan etorizenated lan ag1 + / edta / bc klamben kanthi signifikan sungkowo kanthi signifikan bakteri ing vitro bakteri lan nuduhake komponen bakteri lan eps ing tatu biofilme mouse. Klamben kasebut duwe macem-macem efek ing penyembuhan luka sing kena infeksi lan biofilmi sing kena infeksi, kanthi gaun uyah oksigen sing luwih migunani ing reepithelialalization, ukuran tatu, lan inflamasi sing dibandhingake karo pangobatan kontrol lan klamben salaka liyane. Sifat disigar disigar dandanan perak beda bisa duwe macem-macem efek ing biofilm luka lan penyembuhan, lan iki kudu dianggep nalika milih klamben kanggo perawatan luka biofilm;
Tatu kronis ditetepake minangka "luka sing gagal maju liwat tahap penyembuhan normal kanthi cara sing tertib lan wektu" 1. Tatu kronis nggawe beban psikologis, sosial lan ekonomi kanggo pasien lan sistem kesehatan. Nhsahah taunan mbuwang babagan nambani luka lan comorbiditas sing gegandhengan diprakirakake £ 8,3 milyar ing taun 2017-182. Tatu kronis uga saiki dadi masalah mencet ing Amerika Serikat, kanthi obat Medicare kanggo pasien nambani pasien sing nandhang lara $ 28,1 milyar3.
Infeksi minangka faktor utama nyegah penyembuhan luka. Infèksi asring ditampilake minangka biofilms, sing ana ing 78% tatu sing nemen penyembuhan. Bentuk biofilms nalika mikroorganisme dadi ora bisa dipasang ing permukaan, kayata lumahing tatu, lan bisa agregat kanggo mbentuk polimer ekstrasel (EPS) -proditas. Batu biofilm sing ana gandhengane karo reaksi inflamasi sing saya mundhak ing kerusakan jaringan, sing bisa tundha utawa nyegah healing4. Tambah karusakan ing jaringan bisa uga amarga ana ing bagean kanggo nambah kegiatan metalologroproprotase matriks, kolagenase, elastase lan spesies oksigen reaktif. Kajaba iku, sel-sel lan biofilme yaiku akeh konsumen oksigen lan bisa uga nyebabake hypoxia jaringan lokal, cal deperet saka oksigen penting sing dibutuhake kanggo ndandani jaringan sing efektif.
Diwasa biofilme tahan banget kanggo agen antimikroba, sing mbutuhake strategi agresif kanggo ngontrol infeksi biofilm, kayata perawatan mekanik sing diikuti perawatan antimikroba sing efektif. Amarga biofilmer bisa regenerasi kanthi regenerasi, antimikrobial sing efektif bisa nyuda risiko mundur sawise bedah bedah7.
Perak tambah akeh ing klamben antimikroba lan asring digunakake minangka perawatan baris pertama kanggo luka sing kena pengaruh kronis. Ana akeh klamben perak sing kasedhiya sacara komersial, saben ngemot komposisi, konsentrasi perak beda, lan matriks basis. Maju ing Armband Perak wis nyebabake pangembangan lengen perak anyar. Wangun metallic salaka (AG0) yaiku inert; Kanggo nggayuh efektifitas antimikrobial, kudu ilang elektron kanggo mbentuk ion perak (Ag1 +). Klamben perak tradisional ngemot senyawa perak utawa salaka logam sing, nalika mbukak cairan, bosok kanggo mbentuk Ion Ag1 +. Iki reaksi ion karo sel bakteri, ngilangi elektron saka komponen struktural utawa proses kritis sing perlu kanggo slamet. Teknologi sing dipaten wis nyebabake pangembangan perak anyar, OXYSalts (nitrat perak, Ag7No11), sing kalebu ing klamben tatu. Ora kaya salaka tradisional, bosok uyah sing ngemot oksigen ngasilake agulasi salaka kanthi valence sing luwih dhuwur (Ag1 +, AG3 +). Ing Studi Vitro nuduhake manawa konsentrasi uyah salaka oksional luwih efektif tinimbang perak ion (Ag1 +) nglawan bakteri patogen kayata Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus lan Escherichia coli8,9. Jinis gaun salaka liyane kalebu bahan tambahan, yaiku asam etileniaminmalletetetic (edta) lan benzethonium klorida (bc), sing dilaporake target target perak menyang biofilm. Teknologi perak anyar sing anyar nawakake cara anyar kanggo target biofilms tatu. Nanging, pengaruh antimikrobial sing ana ing lingkungan tatu lan penyembuhan independen penting penting kanggo mesthekake yen ora nggawe lingkungan luka sing ora becik utawa nundha penyembuhan. Kawungke babagan sitotoksisitas perak ing sitotoksitas perak wis dilaporake nganggo pirang-pirang dressing perak10,11. Nanging, ing sitotoksitas vitro durung diterjemahake menyang keracunan VIVO, lan sawetara klamben Ag1 + wis nuduhake profil safety sing apik12.
Ing kene, kita nyelidiki efektifitas karboxXymethylcellulosa busana sing ngemot formulasi salaka novel nglawan biofilm tatu ing vitro lan vivo. Kajaba iku, efek saka klambine iki ing respon kekebalan lan penyembuhan saka infeksi padha ditaksir.
Kabeh klamben sing digunakake ora ana komersial. Klamben serat 3m Kerracel (3m, Knutsford, UK) minangka klamben karbohiplobali 100% cartoXethylcellulosa (CMC) sing digunakake minangka klamben kontrol ing panliten iki. Telung klamben perak antimikroba sing dievaluasi dievaluasi, yaiku 3m Kerracel AG Gaun (3m, Knutsford, UK), sing ngemot 1.7 wt%. Uyah perak oksigenasi (Ag7NA11) ing ion perak sing luwih dhuwur (Ag1 +, Ag2 + lan AG3 +). Sajrone bosok ag7no11, Ag1 +, Ag2 + lan ion kub3 + dibentuk ing rasio 1: 2: 4. Gaun AquaCel Ag Ekstra sing ngemot klorida 1,2% (Ag1 +) (Deeside, Deeside, UK), AG1 +), AG1 +), EDTA lan Benzethonium klorida (Deeside, Inggris) 14.
Galur sing digunakake ing panliten iki yaiku Pseudomonas aeruginosa nctc 10781 (Kesehatan Umum Inggris, Salislococcus aureus NCC 6571 (Kesehatan).
Bakteri wis thukul sewengi ing kaldu muller-hinton (oxoid, altrincham, uk). Budaya sewengi banjur diencerake 1: 100 ing Duduh kaldu mueller-hinton lan 200 μm dilapisi 0,2 taun " ). ) Pembentukan biofilm kolonial ing 37 ° C suwene 24 jam. Biofilm kolonial iki dites kanggo nyusut logaritif.
Potong klambine dadi 3 cm2 persegi lan wis moisten kanthi banyu deionized sing ora aman. Selehake bandage liwat biofilm saka koloni ing piring agar. Saben 24 ha biofilme dicopot, lan bakteri sing bisa digunakake ing biofilm (CFU / ml) diwatesi dening pencerakan serial (10-1 nganti 10-7) ing duduh kaldu neutralisasi awan (Merck-Millipore). Sawise 24 jam inkubasi ing 37 ° C, counter standar ditindakake ing piring Mueller-Hinton Agar. Saben titik perawatan lan wektu ditindakake kanthi triplicate, lan count plate diulang kanggo saben lele.
Kulit weteng daging babi dijupuk saka babi putih sing gedhe ing 15 menit slametan selaras karo standar ekspor Ekspor Eropa. Kulit kasebut dicukur lan di resiki nganggo wipes alkohol, banjur beku ing -80 ° C sajrone 24 jam kanggo nyimpang kulit. Sawise cairan kulit, 1 cm2 dikumbah kaping telu karo PBS, 0,6% sodium hypochlorite, lan 70% etanol nganti 20 menit saben wektu. Sadurunge ngilangi epidermis, copot sisa etanol kanthi ngumbah kaping 3 ing PBS sing resik. Kulit kasebut berbuduk ing plato 6-sum karo membran nilon 0,45-etm (Merck-Millipore) ing ndhuwur lan 3 bantalan nyerep (Sigma) sing diowahi (Sigma) Eagle. Medium (Dulbecco sing diowahi mediumed - Aldrich Ltd.).
Biofilm kolonial thukul kaya sing diterangake kanggo sinau babagan biofilm. Sawise nggawe biofilm ing membran suwene 72 jam, biofilm kasebut ditrapake ing permukaan kulit nggunakake gelung inokasi sing sithik lan membran dicopot. Ing biofilm kasebut banjur dielekake ing dermis babi kanggo tambahan 24 jam ing 37 ° C supaya ngidini biofilm kanggo diwasa lan netepi kulit babi. Sawise biofilme wis diwasa lan dipasang, klamben cm2, sadurunge dibungkus nganggo banyu sterile, ditrapake langsung menyang permukaan kulit lan dielipake ing 37 ° C suwene 24 jam. Bakteri sing bisa dibetakake kanthi rereged kanthi nyetak kanthi seragam viability reagent (invitrogen, teknologi urip, Paisley, UK) menyang permukaan apical sing diterusake lan bisa uga 5 menit. Gunakake kamera digital digital Leica DFC425 kanthi cepet njupuk gambar ing MicroCype Leica MZ8. Area Colour Jambon dipuntakake nganggo Gambar Pro piranti lunak Pro 10 (Media CYBILLICS INC, Rockville, MD image-pro (Mediacy.com)). Mikroskop Scanning ditindakake kaya sing diterangake ing ngisor iki.
Bakteri thukul sewengi diencerake 1: 100 ing kaldu mueller-hinton. 200 μl of Budaya ditambahake menyang 0,2 μm Whatcia Membran Membran (whatman, Maidstone, UK ing Mueller-Hinton Agar. Piring Biofilm disempat ing 37 ° C sajrone 72 jam kanggo ngidini formasi biofilm diwasa.
Sawise 3 dina mateng biofilm, bandage alun 3 cm2 diselehake langsung ing biofilm lan dielem ing 37 ° C sajrone 24 jam. Sawise mbusak bandage saka permukaan Biofilm, 1 ml saka prestobile Cell Vampent reagent (invitrogen, waltham, ma) ditambahake ing permukaan saben biofilm kanggo 20 detik. Lumahing garing sadurunge owah-owahan warna dicathet nggunakake kamera digital (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Siapke budaya sewengi ing Mueller-Hinton Agar, mindhah koloni individu kanggo 10 ml mueller-hinton duduh kaldu lan incebate ing shaker 37 ° C (100 rpm). Sawise inkubasi sewengi, budaya kasebut diencerake 1: 100 ing Duduh kaldu mueller-hinton lan 300 μm International, Maidman, Inggris ing 37 ° C sajrone 72 jam Waca rangkeng-. Waca rangkeng-. Biofilme sing diwasa ditrapake kanggo tatu kaya sing dijlentrehake ing ngisor iki.
Kabeh karya karo kewan-kewan ditindakake ing Universitas Manchester miturut lisensi proyek sing disetujoni dening kantor kesejahteraan kewan lan review etika sing diterbitake dening petugas omah ing sangisore Aspa 2012 ASP. Kabeh panulis nyathet pedoman rawuh. Tikus C57bl / 6ju-minggu lawas (Envigo, Oxon, Inggris) digunakake kanggo kabeh sinau babagan Vivo. Tikus yaiku estetis karo Isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) lan permukaan dorsal dicukur lan di resiki. Saben tikus banjur diwenehi tatu kanggo 2 × 6 mm nggunakake stiefel biopsi punch (Schuco International, Hertfordshire, UK). Kanggo tatu biofilm sing kena infeksi, aplikasi biofilm kolonial 72 jam sing ditandur ing membran kaya sing diterangake ing ndhuwur kanggo lapisan darmal saka lebur kanthi nggunakake cedera lan copot membran. Siji sentimeter persegi saka klamben wis dibasahi nganggo banyu sing resik kanggo njaga lingkungan sing lembab. Klamben ditrapake langsung menyang saben tatu lan ditutupi film Tegaderm (3m, Bracknell, UK) lan Kesehatan Mastisol, Ferndale, MI) ditrapake ing sudhut kanggo nyedhiyakake adhesion. Buprenorphine (Animal, York, Inggris) diterbitake kanthi konsentrasi 0,1 mg / kg minangka analgesik. Cull tikus telung dina sawise cedera nggunakake cara 1 jadwal lan mbusak, halve, lan nyimpen area tatu sing dibutuhake.
Hematoxylin (thermofisher Ilmiah) lan Eosin (pahlawan termofisher) ditindakake miturut protokol pabrikan. Wilayah tatu lan reepithelialisasi wis diwedharake kanthi nggunakake Gambar Pro piranti lunak Pro 10 (media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Bagéan jaringan diluncurake ing XlEnene (Thermofisher Ilmiah, Loughborough, UK), dihidhangi 100-50% kanthi banyu deionized (thermofisher). ImmunoHistochemistrokimia ditindakake kanthi nggunakake VectasTain Elite ABC PK-6104 Kit (Laboratorium Vector, Burlingame, CA) Miturut protokol pabrikan. Antibodi Utama kanggo Neutrofil Nimpl-R14 (ISRMOFISHER Ilmiah MS107B MRY CD107B Murni M3 / 84 (BD Biescience, UK) diencerake 1: 100 ing larutan sing diklumpukake lan ditambahi 2 anti-anti-anti Kit lan Vektor Nova Red Peroxidase (HDP) (Laboratorium Vector, Burlingame, CA) lan Counterters, Counterters. Gambar dipikolehi nganggo mikroskop Olympus BX43 lan Kamera Digital Olympus DP73 (Olympus, Southhend-on-Sea, UK).
Sampel kulit tetep ana ing 2,5% glutaldehyde lan 4% formaldehida ing 0.1 m hepes (pH 7.4) sajrone 24 jam ing 4 ° C. Sampel dehidrasi nggunakake etanol sing diisi lan garing ing CO2 nggunakake kurma Point Point (Quorum, Loughton, UK) lan Sputter Coated kanthi aloi emas palladium kanthi nggunakake sistem sputterer SC7620 Mini SPUTTERER SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Sputterer SC7620 Mini Spa. Spesialisis ora bisa digunakake kanthi nggunakake mikroskop scannora 250 (thermofisher Ilmiah) kanggo nggambarake titik tengah tatu.
Toto-1 iodide (2 μm) ditrapake ing permukaan tikus tikus sing disenengi lan dielipake 5 menit ing 37 ° C (Thermofisher Ilmiah) lan diobati karo SYTO-60 (10 ° C (Thermofisher Ilmiah). Gambar Z-Stack 15 menit digawe nganggo Leica TCS SP8.
Data tikel biologis lan teknis diteliti kanthi nggunakake piranti lunak prisma Grapis v9 (Software Grafpad, La Jolla, CA). Analisis siji cara varian kanthi macem-macem perbandingan nggunakake tes Kirim Dunnett digunakake kanggo nyoba bedane antarane saben perawatan lan klamben sing ora ana gandhengane tanpa antimikroba. Nilai P <0.05 dianggep penting.
Efektivitas saka klamben gelap gel perak pisanan ditaksir marang koloni Biofilm sing staphylococcus aureus lan pseudomonas aeruginosa ing vitro. Klamben perak ngemot macem-macem wangun perak: klamben salaka tradisional ngasilake agama ion; Klamben perak, sing bisa ngasilake Ion Ag1 + sawise tambahan edta / SM, bisa ngrusak matrik biofilm lan mbabarake bakteri kanggo salaka saka perak antibakteri. Ions15 lan klamben sing ngemot uyah AG oksigenated sing ngasilake ag1 +, AG2 + lan ion ag3 +. Efektivitas kasebut dibandhingake karo klamben kontrol sing ora antimikroba sing digawe saka serat gelled. Tetep bakteri sing bisa digunakake ing biofilme saben 24 jam suwene 8 dina (Gambar 1). Ing dina 5, biofilme ditambahi karo 3,85 × 105s. Staphylococcus aureus utawa 1.22 × 105p. Aeruginosa kanggo netepi pemulihan biofilm. Dibandhingake klamben kontrol sing ora antimikroba, ag1 + Klambi paling sithik ing panguripan bakteri ing Staphylococcus aureus lan biofilme Pseudomonas luwih saka 5 dina. Beda, klamben sing ngemot uyah oksigen lan AG1 + + unta / bc efektif kanggo mateni bakteri ing biofilm sajrone 5 dina. Sawise inokulasi bola-bali kanthi bakteri planktonik ing dina 5, ora netepake biofilm sing diamati (Gambar 1).
Quantik saka bakteri sing bisa digunakake ing Staphylococcus aureus lan biofilme aeruginosa sawise perawatan karo klamben perak. Koloni biofilm staphylococcus aureus lan pseudomonas aeruginosa diobati nganggo klamben perak utawa klamben sing ora bisa dikendhaleni, lan jumlah bakteri sing bisa ditemtokake saben 24 jam. Sawise 5 dina, biofilme ditambahi karo 3,85 × 105s. Staphylococcus aureus utawa 1.22 × 105p. Koloni saka bakterioplankton pseudomonas aeruginosa dibentuk kanthi masarakat kanggo netepi pemulihan biofilm. Grafis nuduhake tegese +/- Kesalahan standar.
Kanggo nggambarake efek saka klamben perak ing biofilm, klamben ditrapake kanggo biofilme diwasa sing ditanam ing kulit porcine kulit ex vivo. Sawise 24 jam, klambine dicopot lan biofilm kasebut di wernani nganggo pewabut reaktif biru, sing metabolisasi dening bakteri urip menyang warna pink. Biofilms sing diobati nganggo klambi sing dikontrol yaiku jambon, sing nuduhake anané bakteri sing sregep ing biofilm (Gambar 2A). Beda, biofilm sing diobati karo klamben Oxysol utamane, sing nuduhake manawa bakteri sing isih ana bakteri babi sing ora bisa ditampa saka bakteri babi (Gambar 2B). Pinggiran biru biru lan pink diamati ing biofilms sing diobati karo ag1 + -containing gaun, sing nuduhake anané bakteri sing bisa sregep lan ora cocog karo ag1 + umume biru karo sawetara bintik-bintik sing apik. Nuduhake wilayah sing ora kena pengaruh saka klamben perak (Gambar 2D). Kuantifikasi wilayah sing aktif (pink) lan inaktif (biru) nuduhake yen patch kontrol yaiku 75% aktif (Gambar 2e). Gaun ag1 + + Éstta Nindakake padha karo klamben uyah AG uyah, kanthi tarif kaslametan 13% lan 14%, masing-masing. Klamben Ag1 + uga nyuda daya bakteri kanthi 21%. Biofilms iki banjur diamati nggunakake mikroskop elektron Scanning (SEM). Sawise perawatan nganggo klamben kontrol lan klamben Ag1 +, lapisan Pseudomonas aeruginosa diamati nutupi kulit porcine (tokoh 2F), dene sawise perawatan bakteri ditemokake ing ngisor. Serat kolagen bisa dianggep minangka struktur jaringan kulit porcine (Gambar 2G). Sawise perawatan karo Gaun AG1 + + ursta, plak bakteri lan plak serat collagen katon (Gambar 2I).
Visualisasi saifilm Pseudomonas aeruginosa sawise perawatan klamben salaka. (A-D) Tanggung jawab bakteri ing Pseudomonas aeruginosa biofilme ditanam ing kulit porcine dibukak kanthi nggunakake prestoblue kanthi nggunakake klamben perbean 24 jam sawise perawatan nganggo klamben perak utawa klamben sing ora ana gandhengane. Langsung bakteri yaiku bakteri sing pink, ora sregep lan kulit babi biru. (E) kuantikasi pseudomonas aeruginosa aeruginosa biofilme thukul ing kulit porcine (papan pink) nggunakake gambar mesin mikroskop elektron 10 (fi) nggunakake klamben pérak 10 (fi). SEM ukuran Bar = 5 μm. (J-m) Biofilme kolonial tuwuh saringan lan di wernani karo pewarna reaktif sawise 24 jam inkubasi karo klamben perak.
Kanggo nemtokake manawa kontak cedhak karo klamben lan biofilme sing kena pengaruh efektifitas klamben, biofilm kolonial diselehake ing permukaan sing rata diobrol kanthi klamben sajrone 24 jam lan banjur di wernani kanthi pewarna reaktif. Biofilm sing ora diobati yaiku warna pink ing warna (Gambar 2J). Beda karo biofilms sing diobati nganggo klamben sing ngemot uyah agen (Gambar 2k), biofilm sing diobati nganggo busana sing ngemot AG1 + utawa AG1 + + + + + + + + + + + utawa motret pink (Gambar 2L, m). Pewarna pink iki nuduhake anané bakteri sing sregep lan digandhengake karo area suture ing klamben. Wilayah sing dijahit iki nggawe papan mati sing ngidini bakteri ing biofilm kanggo urip.
Kanggo ngevaluasi efektifitas efektifitas klamben perak ing Vivo, kekandelan sing dikendhaleni tikus sing kena infeksi Diwasa karo Diwasa lan P. Aeruginosa biofilms utawa klamben kontrol nonantimicrobial. Sawise perawatan 3 dina, analisis gambar makrocopik nuduhake ukuran luka sing luwih cilik nalika diobati nganggo klambi uyah oksigen dibandhingake karo klamben kontrol sing ora ana gandhengane lan klamben perak (tokoh 3A-h). Kanggo konfirmasi pengamatan iki, tatu kasebut dipanen lan tatu tatu lan reepithelialisasi diwatesi ing bagean jaringan hematoxylin lan eosin nggunakake gambar piranti lunak versi 10 (tokoh 3i-l).
Efek klamben salaka ing luka lumahing lan epitelialisasi tatu sing kena infeksi karo biofilms. (A-h) Cilik Cilik Duwe Digunakake karo Biofilme Pseudomonas aeruginosa (A-D) lan Staphylococcus aureus (E-H) sawise telung dina perawatan kanthi klamben kontrol nonantimicrobial, lan ag1 + Klamben. Gambar makrosik wakil. Angkat tikus karo ag1 + + ajta / bc klamben. (IL) Wakil Aeruginosa infeksi, bagean sejarah sing di werasi kanthi hematoxylin lan eosin, digunakake kanggo ngupayakake wilayah tatu lan regenerasi epithelial. Kuantifikasi saka tatu tatu (m, o) lan o) lan feephelialization persentasi (n, p) saka luka sing kena infeksi pseudomonas (m, n) lan staphylococcus aureus (saben klompok perawatan n = 12). Grafis nuduhake tegese +/- Kesalahan standar. * tegese p = <0,05 ** Tegese P = <0,01; Skala Macroskopik = 2,5 mm, skala sejarah = 500 μm.
Kuantifikasi saka tatu tatu ing tatu sing kena infeksi Pseudomonas aeruginosa (Gambar 3m) nuduhake ukuran tatu sing rata-rata 2,5 mm2, dene klamben kontrol sing rata-rata 3,1 mm2, sing dudu bener. tekan makna statistik (Gambar 3m). P = 0.423). Wounds dirawat karo ag1 + utawa ag1 + + + + + asta / SM nuduhake ora nyuda wilayah tatu (3.1 mm2 lan 3.6 mm2, masing-masing). Perawatan karo ageman uyah sing didhukung dening re-epitelialisasi kanthi luwih gedhe tinimbang klamben sing ora ana ing 34% lan 15 + utawa AG1 + + + + + + lan 11% lan 11% lan 11% lan 11% lan 11% lan 11% lan 11% lan 11% lan 11% Gambar 3n). Waca rangkeng-. , masing-masing).
Tren sing padha ing wilayah tatu lan regenerasi epitelium diamati ing luka sing kena infeksi s. aureus biofilms (tokoh 3o). Klamben sing ngemot uyah perak oksigen sing suda wilayah tatu (2.0 mm2) dening 23% dibandhingake karo klamben non-antimikroba (2,30 mm2), sanajan pengurangan iki ora signifikan (0,304). Kajaba iku, area tatu ing klompok perawatan Ag1 + rada suda (2,4 mm2), dene tatu sing diobati karo klamben Ag1 + + Éstta / bc ora nyuda wilayah tatu (2,9 mm2). Uyah oksigen ahli pos uga promosi re-epitelialisasi luka sing kena infeksi susik (31%) luwih akeh tinimbang sing diobati tinimbang sing diobati (12%, p = 0.003) (Gambar 3P). Ag1 + Klamben (16%, P = 0.903) lan AG + 1 + ajta / bc klamben (14%, p = 0.965) nuduhake tingkat regenerasi epitel sing padha karo kontrol.
Kanggo nggambarake efek saka klamben perak ing matrik biofilm, Toto 1 lan rereged saka 60 IODIME sing ditindakake (Gambar 4). Toto 1 IODIDE minangka pewarna sel sing ora bisa digunakake sing bisa digunakake kanggo nggambarake asam nukleat ekstrik, sing akeh banget ing eps saka biofilms. SYTO 60 minangka pewarna sel sing bisa digunakake minangka countertain16. Pengamatan saka Toto 1 lan Symo 60 IODIDE ing luka ing Pseudomonas aeruginosa (tokoh 4A-l) nuduhake manawa 3 dina perawatan, EPS ing biofilm sacara signifikan. ngemot uyah oksigen lan ag1 + + + aturta / bc. Gaun tanpa komponen antibiofilm tambahan kanthi nyuda sel-luka kanthi tatu sing diumumake kanthi Pseudomonas aeruginosa nanging kurang efektif ing luka sing digandhengake karo Staphylococcus aureus.
Ing imaging vivo saka biofilm tatu sawise 3 dina perawatan kanthi klamben ngontrol utawa salaka. Gambar Confocal saka Pseudomonas aeruginosa (A-D) lan Staphylococcus aureus (I-L) karo Toto 1 (ijo) kanggo nggambarake asam nukleat ekstrik, yaiku polimer biofilm extracellular. Kanggo ngresiki asam intraselular, gunakake SYTO 60 (abang). asam. P. Scanning mikroskop elektron luka sing kena infeksi Pseudomonas aeruginosa (E-h) lan biofilme aureus (M-P) sawise 3 dina perawatan kanthi klamben kontrol lan perak. SEM ukuran bar = 5 μm. Ukuran Ukuran Imaging Confofal Bar = 50 μm.
Mikroskop Scanning Scanning nuduhake manawa tikus inocululated saka biofilm aeruginosa aeruginosa (tokoh 4m-p) duwe bakteri kanthi signifikan sajrone 3 dina perawatan.
Kanggo ngevaluasi efek saka klambine perak ing peradangan luka ing biofilm sing kena infeksi biofilm sing kena pengaruh karo kendali utawa klambi perak sajrone 3 dina yaiku percamakan sing digawe kanthi nggunakake antibodi lan makrophages. Penemasan kuantitatif neutrofil lan makrophages internal. jaringan granulasi. Gambar 5). Kabeh klamben perak nyuda cacahe neutrofil lan makrofil ing luka sing kena infeksi Pseudomonas aeruginosa dibandhingake karo klamben kontrol non-antimikroba sawise telung dina perawatan. Nanging, perawatan karo busana uyah perak oksigenated nyebabake neutrofil (P = <0.0001) lan makrofag (P = <0.0001) dibandhingake karo klamben perak liyane sing diuji (Gambar 5si, J). Sanajan Ag1 + + + + asta / SM duwe efek sing luwih gedhe ing biofilm tatu, dikurangi tingkat neutrophil lan makrofage menyang ombone sing luwih murah tinimbang klamben Ag1 +. Wounds moderat sing kena infeksi biofilm S. Aureus uga diamati sawise klamben karo AG (P = <0.0001), Ag1 + (P = 0,0008) lan AG1 ++ Estta / bc (p = 0.0043) kendali. Tren sing padha diamati kanggo neutropenia. Bandage (Gambar. 5k). Nanging, mung busana uyah AG oksigenated ing jumlah makrofag ing jaringan granulasi dibandhingake karo kendali ing kendali sing kena infeksi ing s. aureus biofilme sing kena infeksi s. aureus) (tokoh 5l).
Neutrofil lan makrofil diitung ing luka sing kena infeksi Pseudomonas aeruginosa lan stophylococcus aureus sawise 3 dina perawatan kanthi kontrol kendhali tanpa antimikroba utawa klamben sing ora ana. Neutrofils (iklan) lan makrofag (eh) diitung ing bagean jaringan sing di wernani karo antibodi khusus kanggo neutrofil utawa makrofag. Kuantifing neutrofil (i lan k) lan makrofag (J lan l) ing luka sing kena infeksi Pseudomonas aeruginosa (i lan j) lan staphylococcus aureus (k & l) biofilms. N = 12 saben klompok. Grafis nuduhake tegese +/- Kesalahan standar, nilai-nilai signifikan dibandhingake klamben kontrol non-antibakteri, * tegese p = <0.05, ** tegese p = <0.01; *** Tegese P = <0.001; nuduhake p = <0.0001).
Banjur kita netepke efek saka klambine perak ing penyembuhan independen. Wigati sarujuk sing ora kena infeksi sing diobati kanthi klamben kontrol sing ora ana utawa klamben perak sajrone 3 dina (Gambar 6). Antarane klamben perak diuji, mung luka sing diobati karo gambar uyah oksigen sing luwih cilik ing gambar makroskopik sing luwih cilik tinimbang gambar makroskopik tinimbang luka sing diobati kanthi kontrol (Gambar 6A-D). Kuantifikasi saka wilayah luka nggunakake analisis histologis nuduhake manawa rata-rata tatu sawise perawatan karo Gaun Ox2 dibandhingake karo klompok kontrol, nanging bedane kasebut ora bisa nggayuh jumlah statistik (P = 0.488) (FIG . 6I). Beda, ora nyuda wilayah tatu diamati sawise perawatan karo Ag1 + (3.38 mm2, p = 018 mm2, p = 0,08 mm2, p = 0,054) klamben dibandhingake karo klompok kontrol. Tambah regenerasi epitelial diamati karo ageman Oxysol dibandhingake karo klompok kontrol (30%, masing-masing), sanajan iki ora entuk asil sing cocog lan negesake asil sadurunge. Klamben karo Oxysol nyedhiyakake epitelialisasi. -Pencet saka luka sing ora kena infeksi17. Beda, perawatan karo ag1 + utawa AG1 + + + + + + + + + Éstta ora duwe efek utawa nuduhake re-epitelialisasi re-depresi dibandhingake.
Efek klamben perak ing penyembuhan luka kanthi tikus sing ora kena infeksi kanthi reseksi lengkap. (Ad) Gambar makrocopik wakil saka tatu sawise telung dina perawatan kanthi klamben kontrol tanpa antimikroba lan klamben salaka. (Eh) bagean tatu tatu sing di werasi kanthi hematoxylin lan eosin. Kuantifikasi saka tatu tatu (i) lan persentase reepithelialization (J) diwilang saka bagean sejarah ing titik tatu nggunakake piranti lunak analisis gambar (n = 11-12 saben klompok perawatan). Grafis nuduhake tegese +/- Kesalahan standar. * Tegese P = <0,05.
Perak duwe sejarah sing dawa minangka terapi antimikrobial ing penyembuhan luka, nanging akeh macem-macem formulasi lan cara pangiriman bisa uga beda karo beda; Kajaba iku, sifat antibiofilms saka sistem pangiriman perak spesifik ora dingerteni. Sanajan tanggapan imun host pancen efektif kanggo bakteri planktonik, umume kurang efektif nglawan biofilms19. Bakteri planktonik kanthi gampang phagocyntoset dening makrophages, nanging ing biofilme, sel dikumpulake nyebabake masalah tambahan sel-sel sing bisa ditindakake apotosis lan ngeculake tanggapan imun. Wis diamati manawa sawetara leukosit bisa nembus biofilms21 nanging ora bisa bakteri phagocytose sawise pertahanan iki kompromi yaiku kompromi22. Pendhaftaran holistik sing kudu digunakake kanggo ndhukung tanggapan imun host nglawan infeksi biofilm batu tatu. Debridement tatu bisa ngganggu biofilm lan mbusak paling akeh biobarden, nanging tanggapan imun bisa uga ora efektif kanggo biofilm, utamane yen respon imunitas sing wis dikompromi. Mangkono, terapi antimikroba kayata klamben perak bisa ndhukung tanggapan imunitas host lan ngilangi infeksi biofilm. Komposisi, konsentrasi, kelarutan, lan landasan pangiriman bisa mengaruhi efektifitas salaka antimikroba. Ing taun-taun pungkasan, maju ing teknologi pangolahan salaka wis nggawe klamben kasebut luwih efektif9,23. Minangka teknologi klamben salaka, penting kanggo mangertos efektifitas klambine iki ing ngontrol infeksi luburan lan, sing luwih penting, dampakane bentuk perak sing kuat ing lingkungan luka lan penyembuhan.
Ing panliten iki, kita mbandhingake efektifitas loro klamben perak cemlorot kanthi klamben perak konvensional sing ngasilake ag1 + ion nglawan biofilms sing beda-beda ing vitro lan model vivo. Kita uga ngevaluasi efek saka klambine iki ing lingkungan tungas lan penyembuhan mandiri. Kanggo nyilikake pengaruh Matrix pangiriman, kabeh klamben perak sing dites dumadi saka carboxyMethylcellulose.
Evaluasi awal gaun perak iki tumrap biofilme kolonial Pseudomonas aeruginosa lan staphylococcus aureus, loro salt perak lan oksigen ing 5. Kanthi efektif mateni bakteri biofilm ing njero ruangan sawetara dina. Kajaba iku, klambine iki nyegah pembentukan biofilm kanthi bola-bali bola bola bola-bali. Klambi Ag1 + ngemot perak klorida, senyawa perak sing padha lan matriks dhasar minangka ag1 + + + aturta / bc, lan duwe pengaruh winates ing panguripan bakteri ing biofilm. Pengamatan sing Gaun AG1 + + + + + + + Liyane ing15. Asil kasebut ndhukung ide kasebut yen SM lan Edta dadi peran tambahan kanggo efektifitas klamben sing beda karo komponen klamben sakabehe lan anané komponèn klamben iki ing ag1 + Klamben bisa uga nuduhake efisiensi kanggo khasiat vitro. Kita nemokake manawa gaun uyah AXGENATED ngasilake AG2 + lan ion AG3 + nampilake khasiat antibakteri sing luwih kuat tinimbang AG1 + lan ing tingkat sing padha karo ag1 + + edta / bc. Nanging, amarga potensial redoks sing dhuwur, ora jelas kepiye suwene ion AG3 + tetep aktif lan efektif marang biofilms tatu lan mulane kudu sinau luwih lanjut. Kajaba iku, ana macem-macem gaun sing ngasilake agama sing ngasilake Ion Ag1 + sing ora dites ing panaliten iki. Klambi kasebut dumadi saka macem-macem senyawa perak, konsentrasi, lan matrik pangkalan, sing bisa mengaruhi kiriman ion Ag1 + lan efektifitas nglawan biofilms. Sampeyan uga kudu dielingake manawa ana macem-macem macem-macem ing vitro lan ing model Vivo sing digunakake kanggo ngevaluasi efektifitas gaun tatu nglawan biofilms. Jinis model sing digunakake, uga uyah uyah lan protein media sing digunakake ing model kasebut, bakal pengaruh efektifitas klamben. Ing model Vivo, kita ngidini biofilm kanggo diwasa ing vitro banjur pindhah menyang permukaan dermal saka tatu. Tanggepan imun tikel mouse cukup efektif kanggo bakteri planktonik sing ditrapake ing tatu, saéngga mbentuk biofilm sing tatu. Kajaba iku sing diwasa kanggo luka mbatesi efektifitas tanggapan imun kanggo pembentukan biofilm kanggo nggawe biofilm sing diwasa kanthi netepake awake dhewe ing luka sadurunge bisa diwiwiti. Mangkono, model kita ngidini kita ngevaluasi efektifitas klambine antimikroba ing biofilme diwasa sadurunge tatu wiwit waras.
Kita uga nemokake manawa klamben kasebut diparengake efektifitas klamben perak ing vitro-thukul biofilms lan kulit porcine. Kontak cedhak karo tatu dianggep kritis kanggo efektifitas antimikroba saka klamben24,25. Klamben sing ngemot uyah agen oksigenated, ana hubungane karo biofilms sing diwasa, nyebabake nyuda bakteri sing bisa digunakake ing biofilme sawise 24 jam. Beda, nalika diobati karo ag1 + + + + + + + + + + Éstta / bc, nomer sing signifikan bakteri sing sregep tetep. Klambi kasebut ngemot suture ing sadawane kabeh klamben, sing nggawe ruang mati sing nyegah kontak karo biofilm. Ing panaliten ing vitro kita, wilayah sing ora kontak iki nyegah pembunuh bakteri sing bisa digunakake ing biofilm. Kita wis dinilai daya bakteri mung sawise perawatan 24 jam; Suwe-suwe, klamben dadi luwih jenuh, bisa uga ana ruang sing mati, nyuda wilayah kasebut kanggo bakteri sing bisa digunakake. Nanging, iki nyorot penting komposisi klamben, ora mung jinis salaka ing klamben.
Nalika ing panaliten vitro migunani kanggo mbandhingake efektifitas teknologi perak beda, sampeyan uga kudu ngerti efek saka dress kasebut ing biofilms ing VIVO, ing endi jaringan host lan kekebalan menehi efektifitas klamben nglawan biofilms. Efek klambine iki ing biofilme tatu diamati kanthi nggunakake mikroskop elektron lan EPS ing biofilm nggunakake intracellular lan ekstraksi DNA DNA. Kita nemokake manawa sawise perawatan 3 dina, kabeh klamben efektif kanggo nyuda cell-free Cell ing luka biofilm-infeksi, nanging klamben Ag1 + kurang efektif ing luka sing kena infeksi staphylococcus. Mikroskop Scanning Scanning uga nuduhake sing kurang bakteri wis ana ing kutu sing diobati kanthi klamben perak, sanajan iki luwih diucapake nganggo klamben uyah lan ag1 + + + + + + + dibandhingake karo klamben Ag1 +. Data kasebut nuduhake manawa klamben perak Diuji duwe pengaruh pengaruh sing beda ing struktur biofilm, nanging ora ana sing cocog karo biofilm sing bisa ditindakake kanggo perawatan infeksi biofilme; nggunakake lengen perak. Perawatan didhisiki dening ecidement fisik kanggo mbusak bifilm sing paling akeh.
Tatu kronis asring ing kahanan peradangan abot, kanthi sel radang sing isih keluwihan ing jaringan tatu kanggo wektu tatu kanggo wektu tatu sing luwih dawa, nyebabake kerusakan jaringan lan nyuda metabolisme sel lan efisien ing latu sing efisien Biasa Biasa lingkungan tatu tatu tatu iki kanthi marasake penyembuhan kanthi negatif kanthi macem-macem cara, kalebu pencegahan panyebaran sel lan migrasi sitokines27. Minangka klamben salaka dadi luwih efektif, penting kanggo ngerti pengaruh sing ana ing lingkungan tatu lan penyembuhan.
Apike, sanajan kabeh klamben perak kena pengaruh komposisi biofilm, mung gaun uyah perak tuan rumah tambah akeh maneh epitelialisasi saka luka sing kena infeksi kasebut. Data kasebut ndhukung temonan sadurunge17 lan saka Kalan et al. (2017) 28, sing nuduhake profil safety lan keracunan sing apik saka uyah perak oksigenated, amarga konsentrasi salaka sing luwih murah tinimbang biofilms.
Panaliten saiki nyorot prabédan ing teknologi perak ing antarane klamben antimikroba lan pengaruh teknologi iki ing lingkungan tungku lan penyembuhan independen. Nanging, asil kasebut beda karo panliten sadurunge nuduhake yen ag1 + + edta / bc apik banget kanggo kuping terwelu sing tatu terwelu ing VIVO. Nanging, iki bisa uga amarga beda model kewan, wektu pangukuran, lan metode aplikasi bakteri29. Ing kasus iki, pangukuran tatu dijupuk 12 dina sawise cedera supaya bahan aktif klamben kanggo tumindak bifilm sajrone wektu sing luwih suwe. Iki didhukung dening sinau sing nuduhake manawa ulkus sikil sing kena infeksi sing kena disebabake karo agaman nggunakake non-antimikroba. Obat-obatan. Klamben CMC kanggo nyuda ukuran ulcer30.
Bentuk lan konsentrasi perak tartamtu sadurunge ditampilake kanthi cytotoxic ing vitro 11, nanging asil ing vitro kasebut ora mesthi nerjemahake menyang efek ala ing Vivo. Kajaba iku, kemajuan teknologi perak lan pangerten sing luwih apik babagan salaka senyawa lan konsentrasi ing klamben sing mimpin pangembangan peker sing aman lan efektif. Nanging, minangka kemajuan jogan salaka, penting kanggo mangertos pengaruh saka klambine iki ing lingkungan lingkungane31,32,333. Sadurunge dilaporake manawa tingkat epitelialisasi re-epitelialisasi cocog karo makam makrofag sing tambah akeh anti-inflamasi dibandhingake karo pro-inflamasi M1 fenotype. Iki kacathet ing model mouse sadurunge ing ngendi salaka lebu perak dibandhingake karo salaka sulfadizine lan hydroger -34 non-antimikels34.
Tatu kronis bisa nuduhake radang sing gedhe banget lan wis diamati manawa anané neutrofil sing berlebihan bisa ngrusak luka. Ing panaliten ing tikus sing kurang-neutrofil, anané neutrofil sing ditundha reepitelialisasi. Anane neutrofil sing berlebihan nyebabake macem-macem protein sing dhuwur lan spesies oksigen sing reaktif, kayata superoxide lan hydrogen peroksida, sing ana gandhengane karo luka-hawa-nemen3,38. Kajaba iku, peningkatan nomer makrophage, yen ora dikendhaleni, bisa nyebabake tundha luka39. Peningkatan iki penting banget yen makrofag ora bisa transisi saka fenotipasi pro-natoni menyang fenotipe pro-penyembuhan, nyebabake luka sing gagal kanggo metu fase inflamasi. Kita mirsani nyuda neutrofil lan makrofag ing tatu biofilmi sing kena infeksi sawise 3 dina perawatan kanthi kabeh klamben perak, nanging penurunan luwih diucapake nganggo klambi uyah oksigen. Penurunan bisa uga minangka asil langsung saka respon imun kanggo salaka, tanggapan kanggo Biobarden sing suda, utawa tatu sing ana ing tahap penyembuhan mengko lan selekat sing dikurangi. Ngurangi jumlah sel-sel inflamasi ing tatu bisa njaga lingkungan kanggo ngobati penyembuhan. Mekanisme tumindak kepiye carane oxysalts ningkatake penyembuhan infeksi-independen ora jelas, nanging kemampuan Oxrogen peroksida, bisa uga nerangake babagan oksigen, bisa uga nerangake babagan iki lan mbutuhake sinau maneh17.
Tatu sing kena infeksi non-berjuang nemen nyebabake masalah kanggo dokter lan pasien. Sanajan akeh klambi klaim efek antimikroba, riset arang banget fokus ing faktor kunci liyane sing mengaruhi microenvironment tatu. Panaliten iki nuduhake manawa teknologi perak beda duwe khasiat antimik beda lan, beda, efek beda ing lingkungan tatu lan marasake infeksi. Sanajan iki ing vitro lan sinau babagan vivo sing efektifitas kanggo ngobati infeksi luka lan promosi penyembuhan sing dikuatake, kanthi acak perlu kanggo ngevaluasi efektifitas klinim kasebut ing klinik kasebut.
Datasets digunakake lan / utawa dianalisa sajrone sinau saiki kasedhiya saka panulis sing cocog karo panjaluk sing cukup.
Wektu kirim: Jul-15-2024